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服务|概述

定制lenti病毒包装服务

我们使用第三代慢病毒包装系统。我们的慢病毒是VSV-G假分型的。我们使用lti - x™qRT-PCR滴定试剂盒(TAKARA)对香菇制剂进行滴定。香菇制剂请提供至少100 μg质粒DNA,建议DNA浓度为0.5ug/ul~2ug/ul。DNA可以溶解在无菌水中。

对于两个ltr之间插入< 7kb的lenti载体,我们使用超离心浓缩病毒。最终产品采用0.001%F68+DPBS。典型产量为150ul~200ul浓缩病毒,基因组滴度在e+11gc/ml~e+13gc/ml之间。病毒在体内和体外都有良好的应用。

对于插入量大(7~10kb)的lentii载体,我们使用lentix浓缩器(TAKARA)浓缩病毒。产量为800ul~900ul病毒,基因组滴度在e+8gc/ml~e+10gc/ml之间。病毒只适用于体外应用。

由于香菇病毒在4度时不稳定,我们将香菇制剂和储存在-80度,直到提货/装运。

服务地点:3 Blackfan Circle, CLS13060

定制AAV包装服务

我们使用碘伏醇梯度和超离心净化aav。我们可以将AAV载体包装成血清型1、2、5、6、7、8、9、rh10、DJ、Anc80、SHH10、retro、7m8、PHP。年代,PHP。b和PHP.eb。我们用Sybr-Green为基础的qPCR测定aav的效价。纯化后的AAV进一步用0.22um过滤器消毒,在体内和体外应用都很好。最终AAV产品为0.001%F68+DPBS。

我们提供两种规模的AAV生产。对于常规规模的AAV定制制剂,典型产量为250ul~400ul纯化病毒,基因组滴度在e+12gc/ml~e+14gc/ml之间。请提供至少150ug经验证的质粒DNA, DNA浓度在0.5ug/ul~2ug/ul之间。
对于半比例的AAV定制制剂,典型的产量为100~150ul纯化病毒,基因组滴度在e+12gc/ml~e+14gc/ml之间。请提供至少80ug经验证的质粒DNA, DNA浓度在0.5ug/ul~2ug/ul之间。

请确保AAV两个itr之间的插入小于4.7kb。由于itr可能在质粒扩增过程中丢失,请确保在质粒准备后始终用SmaI消化质粒,以确认itr是完整的。你应该看到一个2.6~3kb的骨干带。

由于AAV在4度时稳定,我们将新鲜的AAV制剂保持在4度,直到提货/装运。如需长期储存,请分装并在-80度下储存。

服务地点:3 Blackfan Circle, CLS13060

现成的预制AAV

我们提供不同血清型AAV-GFP和AAV-Cre的预制aav。详情请与本中心联系。

服务地点:3 Blackfan Circle, CLS13060

请求服务

如何提交你的DNA

当地的实验室可以把你的DNA放进我们的寄存冰箱。请在你的试管上标上质粒名称和你的名字。冰箱位于CLS大厦13层13060室。它在CLS13060.13长凳和CLS13065房间旁边。

如果您选择邮寄DNA样本,请使用以下地址:

波士顿儿童医院病毒中心
记者:张一鸣
3 Blackfan Circle, CLS13060
波士顿,马萨诸塞州,02115

如何提交您的iLab订单

请使用BCH ilab站点

  1. 如果您还没有ilab账号,请先完成注册。在注册页面上完成注册表格。浅蓝色的注册按钮位于注册页面的右上角。收到来自iLab的欢迎电子邮件(通常在一个工作日内),其中包含登录凭证。
  2. 转到“核心设施”、“病毒核心”、“请求服务”并下单。

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